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細(xì)胞貼壁粘附劑的組成
細(xì)胞粘附分子的組成
細(xì)胞粘附分子都是跨膜糖蛋白,分子結(jié)構(gòu)由三部分組成:①胞外區(qū),肽鏈的N端部分,帶有糖鏈,負(fù)責(zé)與配體的識別;②跨膜區(qū),多為一次跨膜;③胞質(zhì)區(qū),肽鏈的C端部分,一般較小,或與質(zhì)膜下的骨架成分直接相連,或與胞內(nèi)的化學(xué)信號分子相連,以活化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。
用途及特征:
1. 各種原代細(xì)胞如腦神元的貼壁培養(yǎng);
2. 易漂浮的傳代細(xì)胞系如 PC12 和 HEK293 細(xì)胞;
3. 能夠防止洗滌、換液、藥物處理導(dǎo)致的細(xì)胞漂浮脫落問題;
4. 能夠使真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率增加 2-5 倍;
5. 無細(xì)胞毒性,不影響后續(xù)免疫熒光組化和酶學(xué)測定。
規(guī)格:1 ml,200-500X 濃縮液,溶于過濾除菌生理鹽水。
儲存:常溫運輸,4oC 保存 1 年。
粘附分子的作用方式、作用特點
(1)作用方式——以受體與配體相互配對的形式分布于相互作用的細(xì)胞表面
或ECM中,起作用時多個分子對共同參與。
如白細(xì)胞穿過血管進(jìn)入組織,LFA-1/ICAM,VLA-4/VCAM-1,Mac-1/ICAM-1, selectin等都參與。
(2)作用特點
1)在同一類細(xì)胞中可同時表達(dá)多種CAM:如T細(xì)胞同時表達(dá)CD2,LFA-1, CD4/CD8, CD28,ICAM等,各自發(fā)揮不同的功能。
2)同一個CAM對可具有多種功能,在不同反應(yīng)過程中發(fā)揮不同的作用:如LFA-1/ICAM:既可增強T細(xì)胞與APC/靶細(xì)胞的相互結(jié)合又可作為淋巴細(xì)胞歸巢受體和內(nèi)皮細(xì)胞上的配體參與淋巴細(xì)胞歸巢。
3)作用雙向性:
CAM除介導(dǎo)細(xì)胞粘附作用外,還起傳導(dǎo)信號的作用,而且表現(xiàn)為雙向性的。如B7(CD80/CD86):B7分子與T細(xì)胞CD28結(jié)合促進(jìn)T細(xì)胞活化,同時活化的T
細(xì)胞表達(dá)CD40L,與B細(xì)胞上的CD40結(jié)合促進(jìn)B細(xì)胞增殖和產(chǎn)生免疫球蛋白。CAM介導(dǎo)細(xì)胞粘附和信號傳遞作用:—與細(xì)胞表面CAM的密度和親和力有關(guān)。生理情況下,靜止細(xì)胞表達(dá)CAM數(shù)量有限,親和力也很低,不會引起細(xì)胞聚合,細(xì)胞被激活后,表達(dá)CAM的數(shù)量和親和力才會顯著增高。
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