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G418硫酸鹽溶液(50 mg/mL)使用注意事項(xiàng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
G418 Sulfate (G418硫酸鹽),也稱作Geneticin (遺傳霉素)、G418、G 418或者G-418,是一種結(jié)構(gòu)類似于慶大霉素B1 (Gentamycin B1)的氨基糖苷類抗生素,來源于Micromonospora rhodorangea,常用于篩選表達(dá)neo基因的真核或原核多克隆或單克隆細(xì)胞。G418不僅用于穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選,也用于穩(wěn)定細(xì)胞株的維持。
在細(xì)菌、酵母、原生動(dòng)物、蠕蟲、高等植物和哺乳動(dòng)物中,遺傳霉素通過抑制蛋白合成而抑制或殺死細(xì)胞。其作用機(jī)制為遺傳霉素能夠與70S和80S核糖體結(jié)合,從而阻斷肽鏈延伸,干擾蛋白合成。其抗性基因(主要為neo基因)位于轉(zhuǎn)座子Tn601 (903)或Tn5(來源于細(xì)菌),可以在真核細(xì)胞中表達(dá)。通過基因重組技術(shù)將這些抗性基因?qū)爰?xì)胞,使細(xì)胞表達(dá)抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶(amino-glycoside 3’-phosphotransferase, APH(3)II),從而獲得對(duì)G418的耐藥性,用來篩選和維持培養(yǎng)攜帶抗性基因的原核或者真核細(xì)胞。
本產(chǎn)品為50 mg/mL溶液,經(jīng)過過濾除菌,可以直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。常用工作濃度為100-500 μg/mL。
注意事項(xiàng)
1. 使用時(shí)請(qǐng)注意無菌操作,避免污染。
2. G418不要和其它抗生素/抗真菌劑(如青霉素/鏈霉素)共同使用,因?yàn)樗鼈兪荊418的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。其它的抗生素也會(huì)產(chǎn)生交叉活性。
3. 使用前請(qǐng)置于4℃解凍,充分解凍混勻后再使用。避免反復(fù)凍融。
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