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人視黃醇結(jié)合蛋白試劑盒的組成

更新時間:2024-03-14      瀏覽次數(shù):178

人視黃醇結(jié)合蛋白試劑盒的組成

 

產(chǎn)品名稱人視黃醇結(jié)合蛋白試劑盒  

產(chǎn)品規(guī)格48T/96T                      

儲存條件2-8

有效期6個月

檢測原理試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

洗板方法

1.  手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

2.  自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。 

試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

12孔×8

12孔×4

標準品

0.3mL

0.3mL

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2

2

說明書

1

1

自封袋

1

1

注:標準品濃度依次為:80、40、20、105μg/mL.

操作注意事項

1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡60分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。樣本在使用前也要在室溫平衡60分鐘。

2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.  預處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。

4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。


人視黃醇結(jié)合蛋白試劑盒的組成


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